T.U.F.F. PUPPY est un dessin animé qui met en scène un chien à la fois naïf et sûr de lui : Dudley Puppy. Ce chien est un agent secret qui travaille pour une organisation : la T.U.F.F.

Dudley Puppy est accompagné de Kitty Ktswell, une chatte spécialiste du kung-fu, pour mener à bien ses missions. L’histoire de T.U.F.F. PUPPY se passe dans une ville imaginaire, Pétropolis, où vivent plein d’animaux. Dudley Puppy et Kitty Katswell ne s’entendent pas toujours très bien mais ils doivent pourtant protéger leur ville et le monde entier contre les méchants qui appartiennent à une organisation nommée la D.O.O.M.